欢迎来到维真生物科技有限公司官网
您现在的位置:首 页 > 产品与服务 >  服务项目
产品与服务
请输入基因编号或名称:
产品分类:


Tet-on表达调控系统





1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素(tetracycline,Tet)真核细胞基因调控表达系统。目前,此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。

 

1、四环素调控表达系统的基本原理

Tet调控表达系统通过诱导药物(如四环素和强力霉素等)改变调控蛋白的构象,从而达到调控目标蛋白表达的目的。

Tet调控基因表达系统是以大肠杆菌Tn10转座子上Tet抗性操纵子为基础而建立的。Tet阻遏蛋白(Tet repressor protein, TetR)与Tet操纵子(Tet operator, TetO)能够特异性结合。当无诱导药物存在时,TetR会与TetO结合,从而阻断下游耐药基因的表达;当有诱导药物存在时,TetR的构象会发生改变,并从TetO上脱离下来,使下游耐药基因得以表达,细菌从而获得耐药性。


2、Tet-on调控系统

利用TetR和TetO特异性结合的特点,多种类型的Tet调控系统逐渐发展起来。其中,应用较广泛的为Tet-on激活型系统。

Tet-on系统由调节表达载体和反应表达载体组成。调节表达载体包含一个人巨细胞病毒早期启动子(PhCMV)和反义Tet转录活化因子(reverse tetracycline transcriptional activator,rtTA)。其中rtTA由反义TetR(reverse TetR, rTetR)和单纯疱疹病毒(HSV)VP16 蛋白C端的一段转录激活区域融合而成。反应表达载体由Tet应答元件(Tet-responsive element, TRE)、CMV启动子(minimal CMV promoter, PminCMV)及目的基因组成。其中TRE是7个重复的TetO序列。



Tet-on原理:

由于PminCMV缺少增强子,因此rtTA未与TRE结合时,目的基因不表达;当rtTA与TRE结合时,VP16会使PminCMV活化从而使基因表达。在Dox不存在时,rTetR不能与TRE结合,导致基因表达被抑制;而当Dox存在时,rTetR能与TRE结合,进而使得目的基因表达。



Tet-off原理:

rtTA是由rTetR和VP16融合而成的蛋白,它的表型与tTA相反 。当Dox不存在时,rtTA不能结合TRE, 下游基因表达关闭。当存在Dox时,rtTA的构象发生改变,rtTA集合TRE,下游基因表达开启。




3、Tet-on调控系统的优势

 

Tet-on调控系统集高效率、精准、安全、可逆性四大特点。

 


4、维真Tet-on/off服务项目

Tet-on表达调控系统是当前应用更为广泛的四环素调控系统,所以下面小V将以Tet-on为例对维真可做的服务项目进行简单介绍。

维真生物能为客户提供Tet-on表达调控载体,并能根据客户需要包装成teton的腺病毒、慢病毒和腺相关病毒。目前维真使用的是第三代技术(TRE3G)。第三代技术相比于前两代技术来说,背景更低,药物敏感度也更高。

 

病毒类型

表达载体

慢病毒

pLent-TRE3G-hPGK-teton-puro
pLent-TRE3G-CMV-GFP-P2A-puro
pLent-TRE3G-mir30 shRNA

腺病毒

pADM-TRE3G-hPGK-teton
pADM-TRE3G-mCMV-GFP-hPGK-teton

AAV

pAV-TRE3G-hPGK-teton
pAV-TRE3G-P2A-GFP-hPGK-teton
pAV-TRE3G-mir30-shRNA

        

关 于 维 真

      

质 粒 现 货

      

病 毒 现 货

     

服 务 项 目

      

技 术 支 持  

              

 企业介绍    

 cDNA克隆现货

 神经递质探针   

 表达载体系统 

 研究专题

 

 

   维真腺相关病毒技术专题

 

 荣誉资质      

                 

 人源miRNA克隆  

               

 病毒筛选试剂盒

             

 质??寺》?/a> 

              

 客户文章

 

 

 使命和前景  

 

 shRNA文库 

 预制ORF腺病毒

 腺病毒包装服务  

 产品手册   

 

  

 企业文化  

 shRNA现货克隆

 AAV现货  

 慢病毒包装服务

 常见问题解答

 

 加入我们  

 维真生物试剂产品

 预制miRNA腺病毒

  AAV包装服务

 资料下载

 

  


   



  双标自噬病毒产品

 订单进度查询

 

   

 


 

  shRNA克隆服务

 

 

  

      

 

  

 

  基因突变服务        

关键词:

腺病毒 | 慢病毒 | 腺相关病毒 | 腺病毒现货 | 腺病毒包装 | 慢病毒包装 | 腺相关病毒包装 | 载体构建 | 质粒 | 细胞自噬 | shRNA | sgRNA | AAV包装 | 维真生物
腺病毒载体|慢病毒载体|AAV包装|病毒包装|miRNA|LC3双标病毒|慢病毒转染|慢病毒表达载体|慢病毒感染|慢病毒载体构建|慢病毒滴度测定|慢病包装服务|腺病毒感染|腺病毒感染细胞|腺病毒转染|腺病毒浓缩|腺病毒载体构建|腺病毒载体构建方法|腺病毒滴度|腺相关病毒载体|重组腺相关病毒|腺相关病毒AAV|质粒载体|质粒载体构建|质粒购买|提取质粒|质粒订购|载体构建|表达载体| shRNA |AAV|光遗传|自噬|细胞自噬|慢病毒系统|病毒包装步骤|病毒包装|腺病毒干扰|腺病毒滴度|sirna|表达载体|基因克隆|质粒提取|基因编辑|cdna文库|CRISPR/cas9|cas9|CRISPR|干扰rna|腺病毒包装原理|crispr-cas9

7星彩直播开奖视频
售前客服
客服接待时间8:30-17:00

微信公众账号
北京pk赛车龙虎技巧论坛 老版本128棋牌 北京pk10全天6码计划 天津时时有漏洞吗 网上电子游戏怎样赢 非凡炸金花手机版提现 英冠 双面盘1.99信誉网站 彩票投注单打印机 全天北京pk10赛车7码计划 新疆时时开结果 重庆彩开奖号码官方 时时彩老玩家的经验 重庆时时彩个位经验 火爆通比牛牛手机版下载 好的彩票计划软件下载