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Vigene sgRNA文库


       基因敲除是实现功能缺失型筛选的重要手段,已被广泛应用于靶向药物研究、抗性基因筛选、基因功能研究、基因组转录激活研究及蛋白质运输及定位等方向。

       目前已经广泛应用的RNAi技术的靶标是mRNA,而CRISPR通过RNA识别DNA序列然后再改变DNA序列,是可以遗传的。由于编码mRNADNA序列只占总DNA的极少部分,因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多,更有可能筛选出针对某DNA序列的特异CRISPR靶标。

 在CRISPR/Cas9系统中,sgRNA Cas9 核酸内切酶的复合物能在目的片段生成DNA双链断裂(double-strand breaks,DSBs),诱发由非同源末端连接(NHEJ)修复机制造成的移码突变。CRISPR/Cas9系统可同时沉默多个基因,并具有十分广泛地应用范围,已报道成功应用于细菌、酵母菌、植物、鱼类和哺乳动物中。目前,更加便捷高效的CRISPR sgRNA 文库已逐渐取代 shRNA 文库。


  Vigene人源基因sgRNA慢病毒文库小鼠基因sgRNA AAV文库配合Vigene提供的Cas9稳定表达细胞系,将助您在更短的时间内实现高通量筛??!


一、  Vigene sgRNA文库相关产品及服务


1.Vigene sgRNA质粒/病毒

文库名称

靶向基因名称及数量

SgRNA数量

病毒滴度

Vigene人源基因sgRNA

慢病毒质粒文库

人源基因 19114

76441

激酶基因   763

3052

Vigene人源基因sgRNA

慢病毒包装服务

人源基因 19114

76441

1×108TU/mL

激酶基因   763

3052

1×107TU/mL

Vigene小鼠基因sgRNA

 AAV质粒文库

转录因子 1650

8250

Vigene小鼠基因sgRNA

 AAV病毒包装服务

转录因子 1650

8250

1×1013VG/mL

                           

                             VigenesgRNA AAV载体图谱


     2.Vigene Cas9稳转株现货

细胞名称

来源

7星彩直播开奖视频 www.fuivt.icu 稳定表达基因

HEK293

Cas9

Neuro-2A

小鼠


        3.Vigene Cas9稳转株构建服务

Vigene可根据您实验所需,针对您实验目的细胞,构建Cas9稳转株。详情可联系Vigene销售人员。


二、 Vigene Cas9的活性检测

Cas9的活性检测,可以通过Cas9质粒转染细胞后观察测序结果中的套峰来实现。

Cas9会在识别位点造成DNA双链断裂,断裂处通过易错修复,易造成随机突变。正因如此,通过识别位点上下游引物进行PCR后,产物实为两类PCR产物的混合物,分别是原本序列的PCR产物和突变序列的PCR产物。通过对PCR产物进行测序,将会出现套峰样结果,表明Cas9为有活性的。如未观察到套峰,表明Cas9没有活性或活性极低。

 

                         Vigene Cas9活性检测结果(测序出现套峰样结果)


三、sgRNA文库高通量筛选技术及其优势

SgRNA 文库高通量筛选技术,指的是利用sgRNA质粒/病毒文库,感染cas9稳定表达细胞系,进而达到高通量筛选的目的。

 

                                                           SgRNA文库高通量筛选技术

 相比传统shRNA文库,sgRNA文库具有无可比拟的优势。不仅在操作上节约时间成本,还具有更广泛的应用范围和更卓越的修饰效果。

 
               SgRNA文库高通量筛选技术的优势  

 

 

        

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