欢迎来到维真生物科技有限公司官网
您现在的位置:首 页 > 产品与服务 >  服务项目
产品与服务
请输入基因编号或名称:
产品分类:

 

CRISPR/Cas9载体构建与病毒包装服务



CRISPR/Cas9系统


      2013年2月的《Cell》报道了一种更为精确的基因打靶技术:CRISPR/Cas9介导的打靶系统。该技术自发明以来,迅速被接受并广泛应用于基因打靶研究中。


一.CRISPR/Cas的系统构成和免疫机制


      CRISPR/Cas(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR associated)系统是细菌在噬菌体长期选择压力下,进化出的一种有效的获得性免疫机制。

      CRISPR簇广泛存在于细菌和古细菌的基因组中,是一个特殊的DNA重复序列家族。其由一个前导区(leader)、多个重复序列区(repeat)和多个间隔区(spacer)构成。前导区被认为可能是CRISPR簇的启动子,重复序列区可形成发卡结构,间隔区由俘获的外源DNA组成。

      CRISPR簇附近存在一个多态性家族基因,编码的蛋白质均具有核酸酶、解旋酶、整合酶和聚合酶等活性,并能与CRISPR区域发生相互作用,被命名为Cas(CRISPR associated)基因,目前已发现Cas1至Cas10。

      当外源DNA入侵时,在前导区的调控下,CRISPR被转录为长的RNA前体(pre-CRISPR RNA, pre-crRNA),并通过加工成为一系列含有保守重复序列和间隔区的成熟crRNA,终识别并结合到与其互补的外源DNA序列上发挥剪切作用。


二.CRISPR/Cas9系统的作用原理


      根据Cas蛋白质和参与序列的不同,将目前发现的CRISPR/Cas系统分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。其中,Ⅰ型和Ⅲ型需要多种Cas蛋白共同发挥作用,而Ⅱ型由Cas9单独参与,是研究深入的一种类型。

      在pre-crRNA转录的同时,与其重复序列互补的反式激活crRAN(trans-activating crRNA,tracrRNA)也转录出来。Cas9首先与crRNA和tracrRNA结合形成复合物,此复合物通过PAM序列(5’-NGG-3’)结合并侵入DNA,形成RNA-蛋白-DNA复合结构,进而在与crRNA配对的序列靶点剪切双链DNA。

      通过人工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA(single guide RNA),通过将表达sgRNA的元件与表达Cas9的元件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,便能够对目的基因进行操作,以引导Cas9对DNA的定点切割。

CRISPR/Cas9原理

图1. CRISPR/Cas9系统的作用原理

(Zhang Feng,2013)


三.CRISPR/Cas9系统的优势

CRISPR/Cas9优势

图2. CRISPR/Cas9系统优势


CRISPR/Cas9与TALEN得区别

表1. CRISPR/Cas9与TALEN系统的比较


四. ViGene为您提供CRISPR/Cas9腺病毒包装服务


      传统的CRISPR/Cas9系统往往通过质粒转染的方式进行,不仅转染效率低,而且由于作用时间短往往使得基因敲除效果不佳。相较于质粒转染,病毒感染具有更多优势。来自ViGene的CRISPR/Cas9腺病毒滴度高、纯度好,更好地满足您的实验需求。

      Crispr/Cas9 病毒载体               Crispr/Cas9 病毒载体          

Crispr/Cas9 病毒载体 

图3. ViGene提供的CRISPR/Cas9腺病毒载体图谱


基因组特定位点的精确编辑

TAL Effector Nucleases (TALEN) 服务


Transcription Activator-like Effector Nucleases (TALENs) 转录激活样效应因子核酸酶是具有序列特异性的限制性内切酶,通过融合类转录激活因子效应物(TALE)的DNA结合结构域实现DNA的切割。

TAL 核酸酶具有基因组序列编辑的能力,可以将一段特定的双链DNA打断。打断后通过细胞DNA修复机制进行修复,或通过同源性或非同源性末端连接 (NHEJ),产生敲除突变或在特定位点插入感兴趣的DNA序列。

TALEN原理图

通过这种机制,TALs可以被编程传递任何酶至任何位点并执行基因编辑功能,包括基因敲除、敲入、诱变、基因标记以及用于疾病和治疗模式的研究。


TALEN优点:

? 完全满足个客户需求: 可在任何种类的细胞中编辑任何基因
      ? 位点/序列—基因组序列编辑
      ? 应用广泛: 基因敲除、敲入、诱变、基因标记
** TALEN被Nature Methods 评为“2011年度优秀技术”


Vigenebio TALEN服务主要特点:

      ? 拥有一整套四聚体克隆,可直接用来组装16-21(碱基)重复单元
      ? 连接和转化16-21(碱基)重复单元一步完成
      ? 克隆全部经过全长序列测序


          一对TALEN 质??稍诙┗鹾?48h 构建完成
      ? 业内具竞争力的价格
            - 一组服务为4894元

     ?交货规格 5-10ug DNA
      ? 还可提供腺病毒载体服务
      ? 提供在HEK293T细胞中功能验证服务

 


 

  • 目录编号
  • 描述
  • 价格
C100003 TALEN 18 or 22 nt, packaged adenovirus, 2 viruses delivered as 1x108 viral particles/ml
¥8,470
C100002 TALEN 18 or 22 nt in adenoviral vector, 2 clones delivered as 5 ug DNA
¥7,270
C100001 TALEN 18 or 22 nt plasmid clones, 2 clones delivered as 5 ug DNA,2周
¥4,894

        

关 于 维 真

      

质 粒 现 货

      

病 毒 现 货

     

服 务 项 目

      

技 术 支 持  

              

 企业介绍    

 cDNA克隆现货

 神经递质探针   

 表达载体系统 

 研究专题

 

 

   维真腺相关病毒技术专题

 

 荣誉资质      

                 

 人源miRNA克隆  

               

 病毒筛选试剂盒

             

 质??寺》?/a> 

              

 客户文章

 

 

 使命和前景  

 

 shRNA文库 

 预制ORF腺病毒

 腺病毒包装服务  

 产品手册   

 

  

 企业文化  

 shRNA现货克隆

 AAV现货  

 慢病毒包装服务

 常见问题解答

 

 加入我们  

 维真生物试剂产品

 预制miRNA腺病毒

  AAV包装服务

 资料下载

 

  


   



  双标自噬病毒产品

 订单进度查询

 

   

 


 

  shRNA克隆服务

 

 

  

      

 

  

 

  基因突变服务        

关键词:

腺病毒 | 慢病毒 | 腺相关病毒 | 腺病毒现货 | 腺病毒包装 | 慢病毒包装 | 腺相关病毒包装 | 载体构建 | 质粒 | 细胞自噬 | shRNA | sgRNA | AAV包装 | 维真生物
腺病毒载体|慢病毒载体|AAV包装|病毒包装|miRNA|LC3双标病毒|慢病毒转染|慢病毒表达载体|慢病毒感染|慢病毒载体构建|慢病毒滴度测定|慢病包装服务|腺病毒感染|腺病毒感染细胞|腺病毒转染|腺病毒浓缩|腺病毒载体构建|腺病毒载体构建方法|腺病毒滴度|腺相关病毒载体|重组腺相关病毒|腺相关病毒AAV|质粒载体|质粒载体构建|质粒购买|提取质粒|质粒订购|载体构建|表达载体| shRNA |AAV|光遗传|自噬|细胞自噬|慢病毒系统|病毒包装步骤|病毒包装|腺病毒干扰|腺病毒滴度|sirna|表达载体|基因克隆|质粒提取|基因编辑|cdna文库|CRISPR/cas9|cas9|CRISPR|干扰rna|腺病毒包装原理|crispr-cas9

7星彩直播开奖视频
售前客服
客服接待时间8:30-17:00

微信公众账号
时时彩计划稳赚后二 ag赢钱技巧 最准的平特一肖网 七乐彩充值 双色球61必中计划软件 上海时时信誉平台 七星彩直播开奖今晚的 福彩双色球预测 双色球进五走势图 3d投资计划软件 3分快3稳赚技巧 彩票店承包合同 用打印投注单出票 黑彩挣钱的三种方法 时时彩后二方法 阶梯式投注